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          【論文一分鐘】抓住新生兒肺炎元兇 SAT更勝一籌

          2019-11-21 13:36:00 分類:學術Tips

          解脲脲原體(Ureaplasma urealyticum,Uu)是一類條件致病菌,常寄生于陰道和宮頸。研究報道Uu可刺激炎癥介質釋放,誘發宮內炎癥反應,從而引起自發性流產、胎膜早破、早產等不良妊娠結局,還可引起新生兒肺炎、敗血癥、腦膜炎等。目前尚無特別推薦用于診斷Uu的方法。Uu對生存環境敏感,極易死亡,新生兒早期一次性咽部分泌物或氣管內吸出物樣本Uu檢出率并不高。有關Uu檢測的準確性、評估病程進展程度、判斷預后等問題越來越引起大家的關注。選擇一種較理想的檢測方法對于Uu感染的診治及預后有重要臨床意義。


          RNA-SAT法是近年開展的一種新型核酸擴增技術,其檢測結果可作為區分死菌、活菌的依據,更利于用藥后療效監測,判斷是否治愈,非常適合用于病原體篩查、疾病輔助診斷。


          溫州市人民醫院檢驗科在《中華新生兒科雜志》發表了“RNA恒溫擴增技術診斷新生兒解脲脲原體感染的價值”一文。本研究應用RNA恒溫擴增技術(RNA-simultaneous amplification and testing,RNA-SAT)、熒光定量聚合酶鏈反應(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)及膠體金法檢測210例新生兒咽拭子標本Uu,探討不同方法的應用價值,以期為臨床提供快速特異的病原學診斷方法。


          1、研究方法:


          選取2014年3月至2016年3月本院新生兒科收治的疑似Uu感染患兒,取咽拭子或氣管內分泌物標本,分別采用分離培養法、RNA-SAT法、熒光定量聚合酶鏈反應(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)法及膠體金法檢測Uu,以分離培養法陽性作為參考,計算另外3種檢測方法的敏感度、特異度、陽性預測值和陰性預測值,以及治療后的陰轉率。


          2、研究結果:


          01
          一般資料


          研究期間共納入臨床疑似Uu感染新生兒210例,其中男117例,女93例;早產兒135例,胎齡29~36周,出生體重(1710±200)g;足月兒75例,胎齡37~42周,出生體重(2850±200)g;治療前分離培養法陽性56例。


          02
          不同方法檢測新生兒Uu感染價值比較


          以分離培養法陽性為參考,RNA-SAT法的敏感度、特異度、陽性預測值和陰性預測值均高于FQ-PCR法和膠體金法,FQ-PCR法敏感度和陰性預測值高于膠體金法,特異度和陽性預測值低于膠體金法。見表1。



          RNA-SAT法的敏感度和特異度均高于其他兩種方法,與相關文獻報道基本一致,在一定程度上彌補了新生兒標本取樣病原菌DNA含量偏低造成的假陰性情況。RNA-SAT檢測的是病原體RNA,RNA在普通環境中極易降解,但RNA-SAT陽性預測值和陰性預測值均高于FQ-PCR法和膠體金法,可能原因為RNA-SAT技術依賴于RNA的擴增,而活的病原微生物才能轉錄RNA,FQ-PCR和膠體金法不能區分死菌。


          03
          不同方法檢測Uu陰轉率比較


          分離培養法Uu陽性、臨床資料完善且住院>28d的新生兒共47例,阿奇霉素l0mg/(kg·d)治療1周后,Uu未陰轉的患兒繼續5mg/(kg·d)治療1~2周。治療7d和14d時3種方法檢測Uu的陰轉率差異無統計學意義(P>0.05),治療21d時RNA-SAT法陰轉率高于FQ-PCR法和膠體金法,差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。



          47例口服阿奇霉素治療后7、14、21 d應用3種檢測方法復查,結果顯示RNA-SAT法陰轉率高于FQ-PCR及膠體金法,這與RNA-SAT法活菌擴增、死菌不擴增的特點相符,有效避免了因死菌、雜菌等原因造成假陽性導致過度治療。根據敏感度、特異度等指標綜合判斷,RNA-SAT法和FQ-PCR法對初診、未治療的患兒進行Uu檢測作用相當,均可作為判斷病原體感染的指標。但從陰轉率分析,FQ-PCR法和膠體金法因不能區別活菌和死菌,因此不適合作為判斷治愈的標準。RNA-SAT法由于RNA在死亡的病原體中快速降解并能排除死菌殘留DNA對檢測結果的影響,有利于臨床治療后的療效觀察。


          3、總結


          RNA-SAT法檢測新生兒Uu感染敏感度高、特異度高,提高了新生兒咽拭子或氣管內分泌物標本的Uu感染檢出率,而且RNA在環境中極不穩定、易降解,降低了交叉污染引起假陽性的問題,能更好地判斷療效,適合臨床對患兒進行快速特異的病原學診斷。



          參考文獻:


          童郁, 邵展, 戴顯寧, 等. RNA恒溫擴增技術診斷新生兒解脲脲原體感染的價值[J]. 中華新生兒科雜志, 2017, 32 (5): 371-373.


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